3D培养系统的准备：
选择合适的3D培养系统，如水凝胶或支架，可以支持细胞生长并提供三维环境。 按照制造商的说明书或已建立的方案准备培养系统。 CTL的分离和激活：
使用密度梯度离心等技术，从适当来源（如外周血单个核细胞）中分离CTLs。 根据实验设计，使用特定抗原或丝裂原激活分离得到的CTLs。 通过多轮刺激扩增已激活的CTL群体（如果有必要）。 标记靶细胞：
选择表达被已激活CTLs识别的抗原的靶细胞。 使用荧光染料或其他适当标记物标记靶细胞，以进行可视化和定量分析。 共培养设置：
将预先准备好的3D培养系统与标记过的靶细胞一起接种。 将已激活的CTLs以适当效应器-目标（E：T）比例加入包含靶细胞的同一培养系统中。 确保在3D基质中良好混合和分布两种类型细胞。 孵育和监测：
将共培养系统置于适当条件的培养箱中（如温度、湿度、CO2水平）。 定期使用显微镜或其他成像技术监测共培养，以观察细胞间相互作用、增殖和整体存活性。 细胞毒性评估：
在特定时间点，收集共培养的细胞进行分析。
通过测量靶细胞存活率、CTL激活标记物或细胞毒素（如颗粒酶B、穿孔素）释放等参数来评估细胞毒性。
使用适当的检测方法，如流式细胞术、ELISA或活/死染色法对结果进行定量分析。
内容由零声教学AI助手提供，问题来源于学员提问
